製品の主な仕様
測定方法: 間接 ELISA 法
測定波長: 450 nm
測定試料: 血清
交差性: Human
保管温度: 2-8℃保管
品質保証期限: 本品の有効期限は製造後 12 カ月です。
プレートへの固相化抗原: SARS-CoV-2 スパイクタンパク(S1ドメイン, 大腸菌発現系)
キット内容
1. SARS-CoV-2 スパイクタンパク (S1ドメイン)固相化プレート
2. HRP 標識抗ヒト IgM 抗体
3. HRP 標識抗ヒト IgG 抗体
4. 洗浄液(10× PBST)
5. ウシ血清アルブミン(Diluent用)
6. Diluent 用バッファー (10×)
7. R-1:発色基質(TMB)
8. R-2:反応停止液(1 mol/L 塩酸)
×2
20 μL×1
20 μL×1
100 mL×1
×1
50 mL×1
10 mL×2
10 mL×2
測定原理
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固相化プレート上の リコンビナント SARS-CoV-2 スパイクタンパク (S1ドメイン) と、これを認識する試料中の抗体(以後、抗スパイクタンパク抗体と略称)を反応させる。
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反応後、試料を洗浄操作により除去する。
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固相化プレート上の 抗S1スパイクタンパク抗体と、HRP (Horseradish peroxidase) 標識抗ヒト IgM / IgG 抗体を反応させる。
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余剰の HRP 標識抗ヒト IgM / IgG 抗体を洗浄操作により除去する。発色基質を加えて反応後に発色を止め、450nmの吸光度を測定する。
測定の意義
本キットは、新型コロナウイルス (SARS-CoV-2)のスパイクタンパク (S1ドメイン)を認識する、血清中ヒトIgM抗体とヒトIgG抗体を検出するための間接ELISAキットです。
一般的には、IgM抗体は感染初期に生成され、症状の緩和とともに消失するとされています。IgG抗体はIgM抗体に遅れて産生が始まり、数カ月にわたって血中に残存するとされています。これにより次に感染した際の症状が軽くなったり、発症を防いだりすることが知られています。スパイクタンパクに対するIgM抗体、IgG抗体は感染以外でもmRNAタイプのワクチンで接種でも産生されるため、ワクチン接種後の評価に有用です。
本キット使用文献
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M. S. Ashenagar, A. Matsumoto, H. Sakai, M. Tokiya, and M. Hara, ‘Comparison of CLEIA and ELISA for SARS-CoV-2 Virus Antibodies after First and Second Dose Vaccinations with the BNT162b2 mRNA Vaccine’ , Vaccines (Basel), pp. 1–10, 2022.
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M. Watanabe et al., ‘A Third Dose COVID-19 Vaccination in Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation Patients’ , Vaccines (Basel), vol. 10, no. 11, p. 1830, 2022.
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M. Watanabe et al., ‘The safety and immunogenicity of the BNT162b2 mRNA COVID-19 vaccine in Japanese patients after allogeneic stem cell transplantation’ , Vaccines (Basel), vol. 10, no.2, p. 158, 2022.
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T. Yamashita et al., ‘Preexisting humoral immunity cross-reacting with SARS-CoV-2 might prevent death due to COVID-19 in critical patients’ , J Clin Med, vol. 11, no. 13, p. 3870, 2022.
参考文献
1.)平松 啓一, 標準微生物学, 第 11 版, 医学書院 (2012)
2.)Anu Haveri , “Serological and molecular findings during SARS-CoV-2 infection: the first case study in Finland,” January to February 2020 , Eurosurveillance. Volume 25, Issue 11, 19, Mar 2020.
3.)Wanbing Liu, “Evaluation of Nucleocapsid and Spike Protein-based ELISAs for detecting antibodies against SARS-CoV-2”, J Clin Microbiol. 2020 Mar 30.
4.)Li Guo, “Profiling Early Humoral Response to Diagnose Novel Coronavirus Disease (COVID-19)”, Clin Infect Dis. 2020 Mar 21.
5.)Juanjuan Zhao, “Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients of novel coronavirus disease 2019”, Clin Infect Dis. 2020 Mar 21.